实验二 血红蛋白测定、白细胞计数实验.ppt

实验诊断学LaboratoryDiagnosis新疆医科大学第一临床医学院实验诊断学教研室新疆医科大学第一附属医院医学检验中心张朝霞教授Tel:**********E-mail:xia0513@新疆医科大学第一临床医学院实验诊断学教研室实验二血红蛋白测定和白细胞计数【目的要求】教学目的:通过实验使学生巩固血液学常见检测项目(主要是血红蛋白、白细胞计数)的检测方法和原理。教学要求:、白细胞计数的检测原理;、白细胞计数的检测方法;、白细胞计数检测的注意事项。新疆医科大学第一临床医学院实验诊断学教研室实验内容一血红蛋白测定【原理】在血红蛋白转化液中,除硫化血红蛋白外,其余血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化成高铁血红蛋白,-)结合,生成稳定的复合物氰化高铁血红蛋白(hemoglobincyanide,)。棕红色的氰化高铁血红蛋白在波长540nm处有吸收峰,可用校准的高精度分光光度计进行直接测定,参考液进行比色法测定,根据标本的吸光度即可求出血红蛋白浓度。新疆医科大学第一临床医学院实验诊断学教研室【材料】:采血针、试管、刻度吸管、微量吸管、吸头、分光光度计。:氰化高铁血红蛋白()转化液(文齐液)新疆医科大学第一临床医学院实验诊断学教研室【实验方法】(1)取血20μl,加入5ml转化液中充分混匀,静置5min。(2)分光光度计,波长540nm处,光径(比色杯内径),转化液或蒸馏水调零,测定吸光度(A)。(3)计算:Hb(g/L)=测定管吸光度×64458/44000×251=测定管吸光度×。注:式中:64458是国际公认的血红蛋白分子量,64458mg/L即为1mmol/L血红蛋白的物质浓度,除以1000换算为g/L。44是1mmol/,540nm条件下的吸光系数。251是稀释倍数。实验内容新疆医科大学第一临床医学院实验诊断学教研室实验内容分光光度计使用:,将比色池的盖子打开,通电20分钟使仪器预热。以722型分光光度计为例,其基本的操作步骤为:。、校准液或待测液放入比色池,将空白液置于光路中。,打开比色池盖子,,关上比色池盖子,。新疆医科大学第一临床医学院实验诊断学教研室