实验八 鸡红细胞融合.ppt

实验八 鸡红细胞融合
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二、实验原理
细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization) 是指真核细胞通过介导和培养，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。
目前, 诱导细胞融合的方法实验八 鸡红细胞融合
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二、实验原理
细胞融合(cell fusion)或细胞杂交(cell hybridization) 是指真核细胞通过介导和培养，两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程。
目前, 诱导细胞融合的方法有三种：病毒(Okada, 1958)、聚乙二醇(polyethylene glycol, PEG) (Pontecorvo, 1975)和电激(Zimermann, 1980)。
PEG能改变各类细胞的膜结构，使两细胞相互接触部位的膜脂双层中磷脂分子发生疏散、进而使其结构发生重排，再加上膜脂双层的相互亲合以及彼此间表面张力的作用，引起两个细胞邻接位置的重排质膜在修复时相互合并在一起, 使两细胞的胞质沟通, 从而造成相互接触的细胞之间发生融合。
三、实验用品
1 器材：
离心机，水浴锅，普通光学显微镜；量筒，滴管，刻度离心管，等。
2 材料 ：新鲜鸡血
3 试剂
Alsever液，，，。加重蒸水至100mL 。
%生理盐水 ，
GKN液：氯化钠8g，，，，葡萄糖2g，，溶于1000mL重蒸水中。
Ringer溶液：，，()，溶于1000mL蒸馏水中。
Hanks液：（另溶解），，，，，，，D-，。按顺序依次逐一完全溶解，用时氯化钙和其余混合，共计100mL。
50%PEG混合液：称取适量PEG(4000)放人刻度离心管沸水浴中加热溶