脓毒症大鼠心脏组织基因表达变化的研究.pdf

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脓毒症大鼠心脏组织基因表达变化的研究·论著·刘勇肖雄箭张贝蕾和甕·目前,由脓毒症所引发的全身多器官功能障碍综合征已成为危重病患者最主要的死亡原因之一。尽管新的抗生素不断推出,器官功能支持、血液净化、免疫调理等新技术、新疗法也越来越多地应用于临床,但脓毒症的治疗仍未能取得预期的效果>科湓颍饕T谟谌嗣嵌耘Ф局⒏丛的发生发展机制尚缺乏全面、深入的了解。基因芯片技术是世纪末期发展起来的一项新的规模化生物基因信息分析技术,可以高效、快速地分析规模巨大的基因表达状况。本研究中采用基因芯片技术检测分析脓毒症大鼠心脏组织基因表达的变化情况,力图在基因水平上对脓毒症造成心脏组织病理生理改变的发生机制做一些初步探讨。牧嫌敕椒动物模型制备与分组:健康雄性大鼠只,体重鹤陨虾K估晨耸笛槎有限公司按随机数字表法分成两组,每组只。脓毒症组按文献椒ú捎妹こ嵩┛资复制大鼠肠源性脓毒症模型;对照组只开腹、关腹与复苏,、开腹,摘取心脏,立即置入史垦鱼重壅叁墼匡堂生┱咚塑垦榭炎堡丛鲤堡垒殳塑林建东林辉应用基因芯片技术初步分析脓毒症大鼠心脏组织细胞基因表达谱的变化。方法大鼠只被随机分为脓毒症组和对照组,每组只。采用盲肠结扎穿孔术票复笫笈Ф局⒛型,以透射电镜下心脏组织检查鉴定模型。应用含有龃笫蠡騝寺〉谋泶锲谆蛐酒屑测,,用计算机软件筛选并分析脓毒症大鼠心脏组织术后幕虮泶锉浠⒊醪椒治霰泶锊钜旎蛴肱Ф局⒅涞墓系。结果与对照组比较,脓毒症组大鼠心脏组织共筛选出龀鱿植钜毂泶锏幕颍蓟蛐酒艿闶ィ渲斜泶锷系髡个,表达下调者觥T谝阎9δ芑蛑斜泶锷系髡觯碌髡觯胗激反应、细胞信号转导、糖皮质激素受体、免疫反应、胰岛素样生长因子、细胞物质能量代谢等方面的相关基因功能有关。结论脓毒症大鼠心脏组织出现一系列基因表达异常,用基因芯片检测技术可快速分析。【关键词】基因芯片;脓毒症;.【摘要】目的雄性心;基因表达,,,辏鬔,簂..,.作者单位:福建医科大学附属漳州市医院刘勇福州,福建医科大学附属第一医院林建东、肖雄箭、张贝蕾、林辉通信作者:林建东,簂.·瑇琇。,,.—甌瑂,瓺’;
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液氮中,一℃保存。.橹±砉鄄欤呵腥『,用戊二醛溶液和四氧化锇溶液双固定,经乙醇梯度脱水、树脂包埋,制成超薄切片,透射电镜下观察。.:一大鼠表达谱基因芯片由联合基因技术有限公司制作,每个芯片含有龃笫蠡騝寺探针准备:以试剂采用一步法抽提心脏组织总R訯试剂盒拦鶴进行分离纯化,在弘醋B挤从μ逑抵屑尤弘,反转录合成并纯化探针。:将基因芯片与杂交探针分别于℃水中变性糜谠咏徊种校℃杂交醚趸埔荒仕崮苹撼逡、十二烷基硫酸钠锤聪吹印⒘:用激光共聚焦扫描仪以两种不同波长扫描芯片,图像处理软件分析虲两种荧光信号的强度和比值,,后者显示脓毒症组基因表达显著下调。通过美国国立生物技术信息中心数据库查询基因功能并加以分类。各组大鼠心脏组织电镜检查结果:对照组大鼠心