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pas反应实验报告细胞生物学实验报告一、细胞形态观察及其大小测量 ?分别描述你看到的不同血细胞的形态,并阐述其功能。绘图。血细胞分为红细胞、白细胞和血小板。红细胞:主要的功能是运送氧。白细胞:主要扮演了免疫的角色。当病菌侵入人体时,白细胞能穿过毛细血管壁,集中到病菌入侵部位,将病菌包围,吞噬。血小板:止血过程中起着重要作用。血细胞约占血液容积的45%,包括红细胞、白细胞和血小板。在正常生理情况下,血细胞和血小板有一定的形态结构,并有相对稳定的数量。红细胞呈双凹圆盘状,中央较薄,周缘较厚,故在血涂片标本中呈中央染色较浅、周缘较深。在扫描电镜下,可清楚地显示红细胞这种形态特点。红细胞的这种形态使它具有较大的表面积,从而能最大限度地适应其功能――携O2和CO2。白细胞为无色有核的球形细胞,体积比红细胞大,能作变形运动,具有防御和免疫功能。在血涂片中,血小板常呈多角形,聚集成群。血小板中央部分有着蓝紫色的颗粒,称颗粒区;周边部呈均质浅蓝色,称透明区。电镜下,血小板的膜表面有糖衣,细胞内无核,但有小管系、线粒体、微丝和微管等细胞器,以及血小板颗粒和糖原颗粒等。任意选择你所看到的动物细胞和植物细胞各一个,绘图并进行适当标注,测量其大小,并比较动植物细胞大小的差异。就植物叶片的栅栏组织细胞和红细胞而言,栅栏细胞为长方体形,体积较大,紧密排列成栅栏状;红细胞圆饼状,体积较小,具体数值如实验数值所示在不同的放大倍数下,所测得的细胞大小一致吗?你认为在哪个放大倍数下测定得比较准确?为什么? 测定结果不相同。由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置,都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野,即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大,因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小,所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺,即可求出目镜测微尺每格所代表的长度,然后移去镜台测微尺,换上待测标本片,用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。但是由于不同显微镜及附件的放大倍数不同,因此校正目镜测微尺必须针对特定的显微镜和附件进行,而且只能在特定的情况下重复使用,故当更换不同放大倍数的目镜或物镜时,必须重新校正目镜测微尺每一格所代表的长度。在40倍物镜下看更准确,因为观察的台尺更清晰,可以更精确的读数。二、PAS反应显示糖原和其他多糖物质 1、为所观察到的土豆切片和鼠肝切片绘图,标注其多糖的位置,并描述这两种细胞的多糖分布特点。肝脏切片中,多糖位置表示在靠近核的区域,而土豆细胞中多糖在细胞质液泡中。2、影响PAS反应染色效果的关键步骤是什么? 固定液固定;染色液染色;。3、如何制作徒手切片?应注意什么才能得到薄而均匀的切片?需要快速连续地地切下多片薄片,从中选出较好的切片。三、叶绿体的分离与荧光观察 ,叶绿体主要集中于液泡的周围,呈现红色。 ,自发荧光和次生荧光的区别? 有些生物体内的物质受激发光照射后,可直接发出荧光,如叶绿素的火红色荧光。有的生物材料本身不发荧光,但它吸收荧光染料后同样也能发出荧光,如叶绿体吸附吖啶橙后可发橘红色荧光。叶绿体分离的原理是什么?操作过程中应注意什么? 通过研磨植物叶片使细胞破损,叶绿体释放到提取液中,再通过等渗介质中差速离心去除杂志,再次离心分离出叶绿体沉淀;注意在低温下迅速提取,注意等渗液溶度,离心速度和时间的把握,避免叶绿体破裂。四、吖啶橙染色观察口腔上皮荧光 ) 图口腔上皮细胞荧光染色微量加样器的使用:装吸液头之后扭一下,保证不漏气,吸液到第一停止点,缓慢释放按钮,停留1s,滑出,擦去吸液头外面的液体,不擦尖端。放液先到第一停止点,停1s,到第二停止点,放液要贴壁,也是滑出。分光光度法的原理:Lambert-Beer定律光吸收和什么因素有关A=-lgT直接比较法、标准曲线法。标准曲线法A为纵坐标,浓度为横坐标,取直线部分作定量依据。凝胶层析:分子量大的先出,考了一道给了四种蛋白质的分子量,问哪个先出的。还考了一道分离不同分子量的蛋白质用什么层析的。离子交换层析:和后边的血清γ球蛋白的实验一起考了好几道题,等电点的概念还有离子交换层析的原理一定要清楚,题目会变换一下流动相的ph什么的来考。咱们实验用的是DEAE—纤维素阴离子交换剂,具有碱性基团,和流动相中的阴离子进行交换。离心机的使用:尤其注意平衡哦~根据转