红细胞裂解液说明书.doc

红细胞裂解液使用说明产品简介:红细胞裂解液是一种去除红细胞最简便易行的方法,即用裂解液裂解红细胞,它既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞(仅限于哺乳动物外周血)。裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含红细胞,可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和提取等。保存条件:2-8℃保存。主要成分:NH4Cl,NaHCO3和EDTA。使用说明从全血中得到白细胞:1,红细胞裂解液冰箱预冷,新鲜抗凝血或者冻存抗凝血,按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入红细胞裂解液混匀。2,800-1000rpm离心3-5分钟,离心弃去上层红色液体。3,收集沉淀部分,再加入原血等体积的红细胞裂解液,用去尖吸头轻轻吹打起来。4,800-1000rpm离心3-5分钟,离心弃去上清。5,如果沉淀还有红色,可重复步骤2和3。6,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次。7,重悬细胞,用于培养实验。如想提取RNA,最好只裂解一次,立刻进入下一步实验。而想提取DNA,可以裂解两三次。直接进入下一步实验。组织细胞样品:,离心弃去上清液。℃冰箱中取出ELS裂解液,按1:3-5的比例向细胞沉淀中加入ELS裂解液(1ml细胞压积加入3-5ml裂解液),轻轻吹打混匀。-1000rpm离心5-8分钟,离心弃去上层红色清液。,加入Hank’s液或无血清培养液离心洗2-3次。。,用于后续实验。如提取RNA,最好是于步骤4开始使用DEPC水配制的溶液中进行。,请在洁净台内进行操作。,加入裂解液混匀后可置冰浴中放置3-5分钟。℃进行。,请穿实验服并戴一