脱细胞羊膜的制备及其生物相容性研究.pdf

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· 801 · Chinese J Reparative and Reconstructive Surgery, 2004, V o l 18 (2)
脱细胞羊膜的制备及其生物相容性研究
罗静聪李秀群杨志明邓力△
【摘要】目的制备脱细胞人羊膜(HAAM ) , 检测其细胞相容性和组织相容性, 探讨其作为组织工程支架材料的
可行性。方法新鲜人羊膜经漂洗后戊二醛交联, 0. 5% SDS 震摇 24 小时, 胰蛋白酶消化 4 小时, 充分漂洗, 冷冻干燥,
分装, 环氧乙烷消毒备用。倒置相差显微镜和扫描电镜观察表面结构, 测量孔径, 并作 H E、M allory 染色。体外培养人成
纤维细胞并复合于 HAAM , 倒置相差显微镜和扫描电镜观察细胞的黏附、生长, 四甲基偶氮唑盐(M T T ) 法测定 HAAM
浸提液对培养的人成纤维细胞的细胞毒性。将 HAAM 植入 SD 大鼠背部皮下, 观察其组织相容性。结果 HAAM 的
一面为网状结构, 孔径为 10~ 80 nm , 另一面为致密纤维结构。H E、M allory 染色表明材料无细胞残留, 均为胶原组成。成
纤维细胞能在 HAAM 上黏附、增殖。M T T 示材料细胞毒性为 0 或 1 级, 动物埋置实验无异常反应。结论应用去垢
剂酶消化法处理新鲜人羊膜, 能有效去除组织中的细胞和可溶性成分, 可进一步降低其免疫原性, 保留基质及网状结
构, 有良好的细胞相容性和组织相容性, 可作为组织缺损的修复材料及组织工程的膜支架材料。
【关键词】人脱细胞羊膜细胞相容性组织相容性制备
中图分类号: R 318 R 318 06
PREPARATION OF HUMAN ACELL ULAR AM N IOTIC M EMBRANE AND ITS PATIBILITY AND BIO
COM PATIBILITY L UO J ing cong , L I X iu qun, YA N G Z h i m ing , et al. D iv ision of S tem Cell and T issue E ng ineering
K ey L aboratory of B iotherapy of H um an D iseases M inistry of E d ucation, W est Ch ina H osp ital, S ichuan U niversity.
Cheng d u S ichuan, P. R. Ch ina 610041. E m ail: orthop ***@p ublic. cd. sc. cn
【Abstract】 Objective To p repare hum an acellular am niotic m em brane (HAAM ) and to m easure its
patibility and patibility. M ethods HAAM w ere p repared by chem ical detergent enzym at